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用于光遺傳學(xué)的多波長(zhǎng)五維可調(diào)LED光源

更新更新時(shí)間:2018-04-13 點(diǎn)擊次數(shù):3222

 

遺傳學(xué)(Optogenetics),即結(jié)合遺傳工程與光來(lái)操作個(gè)別神經(jīng)細(xì)胞的活性,發(fā)現(xiàn)腦部如何產(chǎn)生γ波(gamma oscillations),并為它們?cè)谡{(diào)控腦部功能中的角色提供新證據(jù),這將有助于發(fā)展一系列腦相關(guān)失調(diào)的新療法。

光遺傳學(xué)融合光學(xué)遺傳學(xué)的技術(shù),控制特定細(xì)胞在空間與時(shí)間上的活動(dòng)。其時(shí)間上程度可達(dá)到厘秒,而空間上則能達(dá)到單一細(xì)胞大小。2010年光遺傳學(xué)被Nature Methods選為年度方法,同年被Science認(rèn)為是近十年來(lái)的突破之一 。

光遺傳學(xué)是由斯坦福大學(xué)的研究人員開(kāi)始用于研究小鼠大腦的,他們將這項(xiàng)技術(shù)稱(chēng)之為Optogenetics(optical stimulation plus genetic engineering 光刺激基因工程/光遺傳學(xué)),這個(gè)技術(shù)的關(guān)鍵是:科學(xué)家們必須事前向小白鼠體內(nèi)注射一種植物基因,這種基因能夠?qū)Σ煌伾獾拇碳ぷ鞒雒舾械姆磻?yīng),還能通過(guò)自生特性感染類(lèi)似的細(xì)胞。

使用這些光遺傳學(xué)(optogenetic)工具,能夠激活清醒哺乳動(dòng)物的單一神經(jīng)元,并直接演示神經(jīng)元激活表現(xiàn)出的行為結(jié)果。這一光遺傳學(xué)方法使得研究人員能夠獲得關(guān)于脊髓回路的一些重要信息。這種新技術(shù)可以推廣到所有類(lèi)型的神經(jīng)細(xì)胞,比如大腦的嗅覺(jué),視覺(jué),觸覺(jué),聽(tīng)覺(jué)細(xì)胞等。光遺傳學(xué)開(kāi)辟了一個(gè)新的讓人激動(dòng)的研究領(lǐng)域,可以挑選出一種類(lèi)型的細(xì)胞然后發(fā)現(xiàn)其功能。

當(dāng)然現(xiàn)在說(shuō)用于人體實(shí)驗(yàn)還為時(shí)尚早,但是已經(jīng)有一些研究成果已經(jīng)開(kāi)始逐漸走向臨床應(yīng)用。 比如,斯坦福大學(xué)神經(jīng)病Amit Etkin正在努力促進(jìn)有關(guān)嚙齒類(lèi)動(dòng)物焦慮癥研究成果的轉(zhuǎn)化,以利用現(xiàn)有工具改善人類(lèi)相關(guān)疾病的治療。他采用的是經(jīng)顱磁刺激技術(shù),希望能夠像激活小鼠大腦杏仁核區(qū)域的神經(jīng)回路從而減輕它們的焦慮癥狀那樣來(lái)激活人腦中類(lèi)似的回路。雖然這種技術(shù)不如光遺傳學(xué)技術(shù)有針對(duì)性,但卻具有非侵入性的優(yōu)點(diǎn)。 

無(wú)論如何,光遺傳學(xué)開(kāi)辟了一個(gè)讓人激動(dòng)的新研究領(lǐng)域,一些研究人員已經(jīng)開(kāi)始設(shè)想,如果能夠克服生物醫(yī)學(xué)的挑戰(zhàn),確保新基因安全地遞送到人體內(nèi),基于光遺傳學(xué)的治療方法將直接應(yīng)用于人類(lèi)。 

座落于美國(guó)加州的Mightex公司,于2012年推出了世界上*款令人激動(dòng)的多波長(zhǎng)五維可調(diào)光源,可以用于光遺傳學(xué)領(lǐng)域。

1. In Vivo Optogenetics:對(duì)于活體光遺傳學(xué)來(lái)說(shuō),光纖耦合的LED光源可以把光導(dǎo)入到特定的神經(jīng)元上去,而不會(huì)對(duì)其他的神經(jīng)元造成干擾。進(jìn)而,多波長(zhǎng)的光纖耦合LED光源可以使得在不改變空間位置的前提下,不同波長(zhǎng)的光通過(guò)同一根光纖耦合導(dǎo)入到神經(jīng)元上,讓科研實(shí)驗(yàn)變得非常的方便。Mightex公司的FCS和WFC系列LED光源正是為此所專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)。

2. In Vitro Optogenetics:對(duì)于體外光遺傳學(xué)來(lái)說(shuō),為了能夠刺激單個(gè)的神經(jīng)元,因此需要顯微鏡來(lái)達(dá)到一定程度上的空間分辨率,對(duì)于光源來(lái)說(shuō),需要在顯微鏡的視場(chǎng)中對(duì)不同神經(jīng)元的刺激進(jìn)行的控制。Mightex公司的Polygon400 DSI多波長(zhǎng)五維可調(diào)光源正是為此而設(shè)計(jì)。

Mightex公司的Polygon400光源內(nèi)嵌有非常*的光學(xué)系統(tǒng),能夠把來(lái)自于LED的光傳遞到DLP平臺(tái)然后又通過(guò)顯微鏡到達(dá)樣品表面,這種系統(tǒng)化的設(shè)計(jì)可以使得在保持有限衍射圖像性能的前提下達(dá)到zui大的光強(qiáng)度。

同時(shí),由于Optogenetics對(duì)于時(shí)間性能會(huì)有一定的要求,因此即便在超過(guò)4000fps的刷新率以及快速切換的LED情況下,Ploygon400仍然能夠以微秒的精度來(lái)對(duì)光源進(jìn)行控制;同時(shí),用戶(hù)可以從400-700nm的范圍內(nèi)zui多3個(gè)LED波長(zhǎng)內(nèi)置于光源引擎中。

而以上的種種控制,都可以通過(guò)Ploygon400自帶的軟件很容易的完成并由用戶(hù)進(jìn)行為便捷的控制,包含了時(shí)間特性,強(qiáng)度特性,波長(zhǎng)特性,X以及Y軸的移動(dòng)特性。

Polygon400性能規(guī)格

可用的LED波長(zhǎng)和輸出功率
 

波長(zhǎng)(nm)

輸出功率(mW)

靜態(tài)圖像模式

脈沖模式

400

TBD

TBD

470

8.0

15

530

2.2

4.5

590

1.5

3

617

7.0

14

630

7.0

14


控制和時(shí)間

參數(shù)

zui小

zui大

單位

數(shù)位

1

8

Bit

曝光時(shí)間@1bit

250

-

μs

幀頻@1bit

4, 000

-

1/sec

曝光時(shí)間@4bit

1, 600

-

μs

幀頻@4bit

625

-

1/sec

曝光時(shí)間@8bit

8,333

-

μs

幀頻@8bit

120

-

1/sec

輸入觸發(fā)器

TTL / BNC

輸入觸發(fā)延遲

TBD

TBD

μs

輸出觸發(fā)器

TTL / BNC

輸出觸發(fā)延遲

TBD

TBD

μs

如何選擇型號(hào)?

DSI-

x-

xxxx-

xxxx-

xxxx-

xxx

I-內(nèi)置LED

F-光纖或光導(dǎo)輸入

波長(zhǎng)1

波長(zhǎng)2

波長(zhǎng)3

內(nèi)部

使用


參考型號(hào)價(jià)格
      

 

目前,這款Polygon400光源已經(jīng)為數(shù)不少的研究人員購(gòu)買(mǎi)并正在使用。

除了上述提到的Polygon400光源,針對(duì)于光遺傳學(xué)應(yīng)用,Mightex公司還有價(jià)格比較低廉的單波長(zhǎng)與多波長(zhǎng)光纖耦合LED供選擇。

 

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